Resumen: Diversas hormonas trasnsmiten su información al interior de la célula a través de receptores específicos de la membrana plasmática. El objetivo de este trabajo ha sido el análisis de las etapas que tienen lugar desde la formación del complejo ligando-receptor hasta la producción de la respuesta biológica, así como el establecer la capacidad máxima de respuesta de los elementos de la vía de señalización mediante el uso de compuestos que actúen
específicamente sobre uno de los componentes del sistema. El proceso de transducción se ha estudiado en dos etapas bien definidas del desarrollo hepático: el estado fetal y el estado adulto, en los que se han comparado los componentes implicados en la movilización de calcio, la generación de segundos mensajeros derivados de la hidrólisis de fosfolípidos, la activación en enzimas dependientes de calcio, como la ..
Resumen: El Trasplante Hepático Humano (TH) es una opción terapéutica habitual para los pacientes con enfermedades hepáticas avanzadas. Sin embargo todavía se produce una considerable morbi-mortalidad en relación con complicaciones como la hipotensión tras la reperfusión (Síndrome de reperfusión -SPR-) y especialmente con la lesión de isquemia-reperfusión del injerto (I-R). Estas dos situciones podrían estar
relacionadas con alteraciones de la síntesis del óxido nítrico (NO) en el injerto. El objetivo de este trabajo es investigar 1ú si se producen estas alteraciones de la síntesis del NO en el injerto, 2ú Identificar las sustancias que originen estas alteraciones y 3ú Analizar la posible relación entre las alteraciones de la síntesis del NO y la incidencia de SPR y la función precoz del injerto. En ninguna biopsia del injerto hemos encontrado una expresión de la iNOS por análisis Northern ni Western Blot. En el inicio de la reperfusión, el lavado del injerto inhibe reversiblemente la actividad tanto de la eNOS (disminuye la relajación inducida por acetilcolina en anillos de aorta de conejo pre-contraídos con noradrenalina) como de la iNOS (disminuye la formación de nitritos/nitratos y de citrulina marcada a partir de arginina 14C, en cultivos de macrófagos de ratón activados con lipopolisacárido bacteriano). Hemos identificado la presencia de L-N-monometil-arginina y dimetil-arginina asimétrica en el lavado del injerto como los dos principales inhibidores de la NOS, por HPLC y espectrometría de masas. Dichos inhibidores se producen y se acumulan en el injerto durante la isquemia. El SPR no se produce por liberación de NO desde el injerto. Encontramos una asociación entre la presencia de metilargininas inhibidores en el lavado del injerto y la incidencia de SPR, pero sin relación causa-efecto. Existe una relación estadística entre la concentración de metilargininas y la función precoz del injerto, con menor inhibición en los casos con función excelente. Nuestros datos sugieren que la medida de las metilargininas inhibidoras, liberadas tras el catabolismo protético durante la isquemia, podría ser un indicador del estado funcional del injerto
Resumen: Tras la resección quirúrgica de masa hepática mediante hepatectomía parcial (PH), el hígado inicia una recuperación del tejido en la que participan NOS-2 y COX-2. En este trabajo, se ha analizado el papel del NO y las PGs y su interrelación en la regulación del proceso regenerativo: - La deficiencia simultánea de NO y PGs durante la regeneración hepática tras la PH conlleva una apoptosis masiva en hígado y una incapacidad
proliferativa, que determinan una alta tasa de mortalidad en los animales tras la operación. Este proceso es dependiente de la activación de caspasas, puesto que el tratamiento con el inhibidor z-VAD protegió a los animales del daño hepático. El NO ha mostrado ser hepatoprotector frente al daño mediado por citoquinas tras la PH. Por ello, se analizó el efecto de la liberación de NO de manera previa a la PH usando un modelo animal transgénico que expresaba NOS-2 en hígado y un modelo de expresión de NOS-2 en hígado por inyección hidrodinámica: - La liberación de NO en hígado de manera previa a la PH retrasa el proceso de regeneración, con una deficiente activación de NF-KB y Stat-3 y una menor liberación de TNF-(alfa) e IL-6. Además, existe un retraso en la síntesis de DNA en los hepatocitos. La masa hepática regenerada es menor en los animales que expresan NOS-2 en hígado frente a sus controles. - La liberación de NO en hígado protege a los hepatocitos frente al daño apoptótico mediado por Fas, debido a la inhibición de la activación de caspasas. Tanto la deficiencia como la liberación previa de NO retrasan el proceso de regeneración tras la PH. El NO coopera con metabolitos derivados de COX-2 para la recuperación de una masa hepática adecuada y ejerce un efecto hepatoprotector frente al daño apoptótico mediado por Fas en el hígado.
